【试剂组成】1.预包被板 | 48T/96T; | | 7. 终止液(6号液) | 1支; |
2.酶结合物(1号液) | 1支; | | 8. 阳性对照品 | 1支; |
3.浓缩洗涤液(2号液) | 1支; | | 9. 阴性对照品 | 1支; |
4.底物(3号液) | 1支; | | 10.不干胶膜 | 1/2片; |
5.显色剂(4号液) | 1支; | | 11.自封袋 | 1个; |
6.样本稀释液(5号液) | 1支; | | 12.使用说明书 | 1份; |
【操作程序】1.洗涤液配制 用蒸馏水或去离子水将浓缩洗涤液(2号液)按1:10稀释,如取50ml浓缩液与450ml蒸馏水或去离子水充分混匀即为工作洗涤液。2.样本稀释 用样本稀释液(5号液)将待检血清样本按1:100稀释,如取5ul样本与495ul样本稀释液,混匀。阴性、阳性对照品不用稀释,直接加样。3.加样反应 每次试验设阴性对照2孔、阳性及空白对照各1孔(分别加入阴性、阳性对照及样本稀释液100ul)。样本检测孔每孔加已稀释血清样本100ul。37℃避光反应30分钟后,甩去孔内液体,每孔注满工作洗涤液洗涤3次,每次均需停留1分钟后再甩净,拍干。4.加酶反应 除空白对照孔外,每孔加酶结合物(1号液) 1滴。37℃避光反应30分钟后,甩去孔内液体,如上洗涤,拍干。5.显色反应 加底物液(3号液)和显色剂(4号液)各1滴,混匀,37℃避光显色10分钟。加终止液(6号液)1滴,终止反应(加终止液后,蓝色会变为黄色)并判读结果。
【结果判断】 阴性对照呈无色或浅黄色,阳性对照呈明显黄色,表示试验有效。 以空白对照调零,用酶标仪于450nm(630nm作参比波长)读取吸光度(
A值)。待检孔
A值大于阴性对照
A值平均值的2.1倍者判为阳性。如阴性对照
A值的平均值低于0.08时按0.08计算。
【注意事项】1.试剂盒于2-8℃保存,有效期6个月。每次使用前应先平衡至室温。2.未使用完的板条应密封保存。3.试剂盒中终止液具有腐蚀性,要小心使用。4.瓶盖每次使用后要拧紧,各瓶盖之间不可混用。不同批号试剂盒的试剂组份不可混用。5.试验样本应为无染菌、无血脂、无溶血的血清。任何样本都应视为传染源妥善处理。6. 37℃孵育时,建议使用水浴箱。如无条件,可在温箱中放置湿盒进行反应并同时用不干胶膜封盖板孔。