Sephadex 葡聚糖凝胶通过表氯醇交联多个葡聚糖得到。
葡聚糖是以蔗糖为底物的细菌Leuconsostocmesenteroides(删)的代谢产物,为线性高度聚合碳水化合物的总称。由于每个葡聚糖单元含有三个羟基,因此葡聚糖易溶于水。要使葡聚糖不溶于水,而成为可以在水中溶涨的凝胶,就必须与双官能团的表氯醇交联。表氯醇的比例越大,交联成分越高,胶的溶涨能力就越小,排阻极限就越低,这时的产品为G-10、G-25等。
我们知道G-10、G-25这些葡聚糖凝胶是在水溶液中使用,若要用有机溶剂作为流动相,只有通过羟丙基化将Sephadex G转化为可在有机溶剂中溶涨的葡聚糖凝胶。这时的产品为Sephardex LH-20.
层析原理:
- 凝胶过滤--------依赖于分子的大小和形状
- 吸附层析-----依赖于被分离化合物与凝胶之间的氢键数量和质量
- 分配层析----------------依赖于被分离化合物在流动相(溶剂)和固定相(凝胶)之间的分配,这主要由样品的极性和溶剂的极性决定的。
特点:
- 适合用有机溶剂分离嗜脂性分子,可以非常经济地大规模制备各种天然产物
- 结合凝胶过滤、分配色谱及吸附性层析于一身,分离结构非常相近的分子
- 载量可高达300mg样品/ml凝胶,极少需要再生,分离效果可保持十几年不变