赭曲霉毒素ELISA检测试剂盒

产品名称：赭曲霉毒素试剂盒

产品概述：赭曲霉毒素A是由曲霉菌和青霉属菌株产生的一种有毒真菌次级代谢产物，广泛存在于谷物及谷物产品、香料和咖啡豆等产品中。赭曲霉毒素A具有很强的肝脏和肾脏毒性，并有致畸、致突变和致癌作用，严重危害人类健康。赭曲霉毒素一般用薄层色谱、高效液相色谱法检测,但因其操作繁杂、费用昂贵而影响实际应用。而使用赭曲霉毒素ELISA试剂盒则能够快速而准确的分析样品中赭曲霉残留。

适用范围

赭曲霉检测试剂盒可定性、定量检测谷物、饲料、面粉、啤酒、红酒、饮料等样本中的赭曲霉毒素。

试验原理

赭曲霉毒素试剂盒采用竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被赭曲霉毒素A抗原，加入样本及辣根过氧化物酶标记的赭曲霉毒素A 抗体。样本或标准溶液中的赭曲霉毒素A与预包被在微孔板上的赭曲霉毒素A抗原竞争结合辣根过氧化物酶标记的赭曲霉毒素A 抗体，与样本或标准溶液中的赭曲霉毒素A结合的酶标抗体在洗涤时被除去，再加入显色液，读取吸光度值。样本的吸光值与其所含残留物赭曲霉毒素A抗原的含量成负相关。对照标准曲线，即可得出相应残留物赭曲霉毒素A的含量。

试剂配制

1、将赭曲霉毒素试剂盒取出放置在室温中，使试剂盒回温至室温（20～25℃）。

2、 样品稀释液：用去离子水将浓缩样品稀释液按1:9体积比进行稀释（1份浓缩样品稀释液+9份去离子水）。2－8℃保存三个月。用前混匀。

3、 10倍稀释洗涤工作液：用去离子水将浓缩洗涤液按1:9体积比进行稀释（1份浓缩洗涤液+9份去离子水），2－8℃保存三个月。用前混匀。

操作步骤

1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20～25℃）平衡30min以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。

2、取出需要数量的微孔板，将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封，保存于2～8℃。不要冷冻。

3、洗涤工作液在使用前也需回温。

4、编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

5、加标准品/样本：加标准品/样本50ul/孔到对应的微孔中，再加入酶标物50ul/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光环境中反应15min。

6、洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤工作液300ul/孔，充分洗涤5次，每次间隔30s，用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破）。

7、显色：加入底物液100ul/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光环境反应15min。

8、测定：加入终止液50ul/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处测定每孔OD值。

注意事项

1、室温低于20℃或试剂及样本没有回到室温（20～25℃）会导致所有标准的OD值偏低。

2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。

3、每加一种试剂前需将其摇匀。

4、反应终止液为2M硫酸，避免接触皮肤。

5、不要使用过了有效日期的试剂盒；也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂，掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低；不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。

6、储存条件

   保存赭曲霉毒素试剂盒于2～8℃，不要冷冻，将不用的酶标板微孔板放进自封袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下。

7、试剂变质的迹象

发色试剂有任何颜色表明发色剂变质，应当弃之。0标准的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）时，表示试剂可能变质。

8、赭曲霉毒素试剂盒反应温度为25℃，温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。

试剂盒组成

1、96孔酶标板×1块 

2、标准液×6瓶：（1ml/瓶） 

0ppb, 1ppb, 2ppb, 6ppb, 18ppb,54ppb

3、酶标物 1瓶  …………………………………………… 6ml

4、显色液1瓶    ………………………………………  12ml 

5、终止液      ………………………………………6ml

6、浓缩洗涤液 （10×） ………………………………… 40ml

7、浓缩样品稀释液（10×） ……………………………… 20ml

8、操作说明书

贮藏条件及保存期

        贮藏条件：保存试剂盒于2～8℃。

保存期：赭曲霉毒素试剂盒有效期为12个月。

如果您有技术上的问题也可以打电话咨询我们，我们有自己独立的先进的实验室，届时将竭诚为您服务。