黄曲霉毒素M1 （Aflatoxins M1）ELISA检测试剂盒

产品名称：黄曲霉M1试剂盒

产品概述：黄曲霉毒素是一类真菌（如黄曲霉和寄生曲霉）的有毒的代谢产物，它们具有很强的致癌性，主要存在于谷物、坚果、棉籽以及一些和人类血液，动物饲料相关的产品中。黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的羟基化代谢产物，也是一种强致癌物质。牛乳及其制品是易受到黄曲霉毒素M1污染的食品之一。Aflatoxin M1的检测方法有高效液相色谱法(HPLC)，薄层层析法(TLC)等。而使用黄曲霉毒素M1 ELISA试剂盒则能够快速而准确的分析样品中黄曲霉毒素M1残留。

适用范围

黄曲霉毒素M1 ELISA试剂盒可定性、定量检测牛奶，奶粉等样本中的黄曲霉毒素M1

检测限：0.1ppb

试验原理

黄曲霉毒素M1 ELISA试剂盒采用竞争ELISA，在微孔板上预包被黄曲霉毒素M1抗原，加入样本（或黄曲霉毒素M1标准品溶液）及辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素M1抗体。样本或标准品溶液中的黄曲霉毒素M1与预包被在板孔上的黄曲霉毒素M1抗原竞争结合辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素M1抗体。与样本或标准品溶液中的黄曲霉毒素M1结合的酶标抗体在洗涤时被除去。再加入TMB显色液，读取吸光值。样本的吸光值与其所含残留物黄曲霉毒素M1抗原的含量成负相关。对照标准曲线，即可得出相应残留物黄曲霉毒素M1的含量。

试剂配制

1. 样品稀释液：用去离子水将浓缩样品稀释液按1:9体积比进行稀释（1份浓缩样品稀释液+9份去离子水）。

2. 洗涤工作液：用去离子水将浓缩洗涤液按1:9体积比进行稀释。

操作步骤

1. 将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20～25℃）平衡30min以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。

2. 取出需要数量的微孔板，将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封，保存于2～8℃。不要冷冻。

3. 洗涤工作液在使用前也需回温。

4. 将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

5. 加标准品/样本50ml到对应的微孔中，加入酶标物50ml/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光环境中反应30min。

6. 小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤工作液300ml/孔，充分洗涤5次，每次间隔30s，用吸水纸拍干。

7. 加入显色液100ml/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光环境反应30min。

8. 加入终止液50ml/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处测定每孔OD值。

注意事项

1. 室温低于20℃或试剂及样本没有回到室温（20～25℃）会导致所有标准的OD值偏低。

2. 在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。

3. 每加一种试剂前需将其摇匀。

4. 反应终止液为2M盐酸，避免接触皮肤。

5. 不要使用过了有效日期的试剂盒；也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂，掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低；不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。

6. 储存条件：

保存试剂盒于2～8℃，不要冷冻，将不用的酶标板微孔板放进自封袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下。

7. 试剂变质的迹象：

发色试剂有任何颜色表明发色剂变质，应当弃之。0标准的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）时，表示试剂可能变质。

8. 在加入底物液液后，一般显色时间为20～30min即可。若颜色较浅，可延长反应时间到35min（或更长），但不得超过40min。反之，则减短反应时间。

9. 该试剂盒反应温度为25℃，温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。

试剂盒组成

1. 96孔酶标板×1块 

2. 标准液×6瓶：（1ml/瓶） 

   0ppb, 0.1ppb, 0.3ppb, 0.9ppb, 2.7ppb, 8.1ppb

3. 酶标物 1瓶  ……………………………………… 6ml

4. 显色液1瓶    ……………………………………  12ml

5. 终止液一瓶    ………………………………………6ml

6. 浓缩洗涤液 （10×） ……………………………… 40ml

7. 浓缩样品稀释液（10×）  ………………………… 20ml

贮藏条件及保存期

        贮藏条件：保存试剂盒于2～8℃。

        保存期：该产品有效期为12个月。

如果您有技术上的问题也可以打电话咨询我们，我们有自己独立的先进的实验室，届时将竭诚为您服务。