双光子荧光显微镜
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德国Lavision Biotec
---双光子荧光显微镜TriM Scope
双光子吸收/激发技术的原理:在强光激发下,分子同时吸收两个光子,从基态跃迁到两倍光子能量的激发态的过程。两个光子可以是相同波长的,也可以是不同波长的,但必须是同时吸收(两个光子到达被激发分子的时间间隔小于1飞秒)。可以这样理解,先吸收一个光子的能量跃迁到一个虚拟的中间态,然后再吸收一个光子的能量跃迁到激发态。
双光子显微镜相对于共聚焦等其他显微镜的优点:
 ~ 光损伤小:由于双光子显微镜使用的是可见光或近红外光作为激发光源,这一波段的光对活体细胞和组织的光损伤小,适用于长时间的研究;
 ~ 穿透能力强:相对于紫外光,可见光和近红外光都具有更强的穿透能力,因而受生物组织散射的影响更小,解决对生物组织中深层物质的层析成像研究问题;研究表明,共聚焦荧光成像的成像深度一般在50微米左右,而双光子显微镜的成像深度可达1000微米;

 ~ 高分辨率:由于双光子吸收截面很小,只有在焦平面很小的区域内可以激发出荧光,双光子吸收仅局限于焦点处的体积约为波长3次方的范围内; 
北京大学谢晓亮教授(北大长江讲座教授;哈佛讲席教授,美国科学院院士)在美国哈佛大学使用LaVision BioTec的双光子显微镜之后,在北京大学建立北京生物动态光学成像中心之时,又再度引进双光子显微镜,并且给予显微镜该高度评价。
 
LaVision BioTec的双光子显微镜TriM Scope的独特优势:
 ~ 独有的多光束快速扫描模式:用户可根据需要调节光束模式从传统的单光束扫描模式到La Vision BioTec独有的多光束快速扫描模式,即1248163164束光的不同模式选择。快速扫描模式即可保证可允许64束光同时扫描,并且保证的样品损伤。
 ~ 个可用软件调节的双光子显微镜:ImSpector Pro软件支持了先进的扫描模式,并且支持用户在ms毫秒之内切换扫描区域。因此,TriM Scope 是研究光活化、光释放和光漂白(photo activation, uncaging and FRAP )的理想完美工具。
 ~ 优的检测效率:TriM Scop可以支持多达8 non-descanned PMT, NDD可以是cooled generation III GaAsP PMT或者APD detector可以多传输40%效率的量子。 
 ~ 能够支持OPO技术的显微镜:OPO技术– 红光和蛋白的激发:经典的Ti:Sa激光器成像红光的能力是非常有限的,因为经典的激发波长是1125到1250 nm, 并不在Ti:Sa激光器的转换范围之类。OPO技术解决了这个问题,因为它能传输可调的fs激光脉冲到>1100 nm的范围。
 
  代双光子显微镜:LaVision BioTec革新的技术提供了独特的双光子显微镜-TriM Scope I

 ~ 用户可根据需要调节光束模式:从传统的单光束扫描模式到La Vision BioTec的多光束快速扫描模式,即1、2、4、8、16、31、64束光的不同模式选择。快速扫描模式即可保证可允许64束光同时扫描,并且保证的样品损伤,主要有下面三个原因:

  • 64束光能够提供单光束的64倍荧光强度并且保证低损伤高荧光强度
  • 保证了高的帧速率
  • CCD摄像头比PMTs更高灵敏度

 ~ 提供多达8NDD摄像头给经典的单光束扫描显微镜2CCD摄像头,1TCSPC 探测器为FILMFluorescence Lifetime Imaging Microscope )测量。3 NDD可以安装到靠近物镜的位置,2 NDD可以插入到传送器。
 ~ LaVision BioTecImSpector Pro软件支持了先进的扫描模式,并且支持用户在ms毫秒之内切换扫描区域。因此,TriM Scope 是研究光活化、光释放和光漂白(photo activation, uncaging and FRAP )的理想完美工具。

 ~ TriM Scope 还可以结合1OPO使用OPO可以转换Ti:Sa激光器的波长从800-880 nm转变到1100-1300 nm。因此红光染料或者蛋白质可以被有效地激发出双光子,就保证了很低的漂白率和深的穿透深度。LaVision BioTec可以同时使用Ti:Sa激光和OPO来扫描,就能同时激发出绿/黄和红光。

 
MitochondriaHela cellshuman skin
Biopsie of LungSHG & Red in ZebrafishImage in Lung Slice
 
第二代双光子显微镜 : LaVision BioTec新的双光子显微镜-第二代双光子显微镜TriM Scope II具有一些新的特点:
TriM Scope II双光子显微镜提供了第二代的双光子显微镜,并且在各种使用环境下能够完成快速、深度成像。基本配置是单光束扫描元件,包括正置机身和2个靠近物镜的NDD检测器。作为选件,该显微镜可以配置:
 ~ 多可达到8个NDD检测器
 ~ 各种不同的CCD摄像头
 ~ LaVision BioTec的快速TCSPS检测器
 ~ 用于共聚焦检测的descanned检测器
 ~ 预啁啾补偿器
 ~ OPO
了解更多产品信息:https://www.qd-china.com/products2.aspx?id=47