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性能卓越的ProminenceUFLC,开创了超快速液相色谱分析新天地。真正实现快速化与高分离性能兼备。
岛津公司彻底解析阻碍实现快速化的原因,实现了不依赖于高压的快速化和高分离分析,更为重要的是成功地同时具备了以往快速LC未能达到的高与扩展性。
ProminenceUFLC彻底追求“速度”、“重现性”以及“扩展性”的理由在于——此三要素正是HPLC的起始点,同时也是超快速LC的新标准。
技术参数:
Prominence 支持快速分离
Prominence使用标准部件,可以同时满足研究人员传统分析和高速分析的需求,也可以支持高达85℃的操作温度,从而使更低压力下的快速分析成为可能,同时该仪器体现出的分析性能和通量水平即使是在更昂贵的仪器配置上也不多见。
Prominence UFLC通过以下特性支持快速分析:
1、小柱管和小体积的流通池降低了柱外峰展宽效应。
2、使用2.2μm颗粒大小的色谱柱Shim-pack XR-ODS。
Shim-pack XR-ODS是考虑上述填料细微化的问题,从分离效率和压力的关系中巧妙找到平衡,可提高或维持分离效果的同时缩短分析时间的新一代快速分析用色谱柱。
Chromatographic conditions; column: described above, mobile phase: water/acetonitrile (3/7,v/v), flow rate: described above, temperature: 40℃, detection: absorbance at 245 nm, sample volume: 4μL(XR-ODS), 10μL(VP-ODS).
Peaks; 1: actophenone, 2: propiophenone, 3: butyrophenone, 4: balenophenone, 5: hexanophenone, 6: heptanophenone, 7: octanophenone.
3、 Prominence SIL-20A自动进样器实现10秒钟10μl的超快速进样。
Chromatographic conditions; column: Shim-pack XR-ODS(3mm i.d.×30mm, 2.2μm), mobile phase: water/acetonitrile(4/6 to 2/8 in 0.4 min, convex gradient), flow rate: 3mL/min, temperature: 80℃, detection: absorbance at 245 nm, sample volume: 4μL(each 800 nm ol),.0.1 min delayed injection.
Peaks; 1: actophenone, 2: propiophenone, 3: butyrophenone, 4: balenophenone, 5: hexanophenone, 6: heptanophenone, 7: octanophenone.
4、 支持高达85℃的高温分析。
温度与快速分析:随着柱温升高,理论塔板数增加,柱效增高,柱压降低。
Chromatographic conditions;
mobile phase: water/acetonitrile (3/7, v/v),
detection: absorbance at 245 nm.
Peaks: 1: 苯乙酮 2: 苯丙酮 3: 苯丁酮 4: 苯戊酮 5: 苯己酮 6: 苯庚酮 7: 苯辛酮
温度对化合物的影响:高温分析在降低柱压方面很有效,但是高温引起色谱柱的劣化、导致样品分解等不足在应用时需要引起注意。高温分析只是作为快速分析的辅助手段加以运用。
5、具备高采样频率的检测器,可以实现快速的数据获取而不会丢失信息。
6、专门的色谱方法转换软件,使常规色谱条件转换为UFLC条件简单易行,保证分析方法的通用性。
快速分析的重现性
在快速分离中要取得成分保留时间的重现性要比常规分析中更加困难。保留时间的重现性(RSD)和时间的平方根成反比增大,所以需要比常规分析更为严格的送液性能。Prominence UFLC可以保证送液分辨率 3nL/min的微冲程送液、梯度送液时控制响应为0.1秒的卓越送液能力,可以发挥极为优越的保留时间重现性。
什么是高通量
快速液相色谱的目标就是高通量,也就是说每天或每小时有更多的样品被分析。为了实现高通量,不仅要缩短单个样品分析时间,而且整个循环进样和分析时间也必须优化。追求快速化的本意不仅是缩短分析时间,而且是缩短分析周期。Prominence UFLC的样品注入速度为10秒,使得分析周期得以大为缩短。
应用实例
PTC衍生氨基酸的UFLC分析
氨基酸分析有两种检测方法,其一是使用离子交换色谱柱分离之后,进行衍生化再检测的柱后衍生化法,另一种是先衍生化后,使用反相色谱柱进行分离的柱前衍生法。从快速分析的角度考虑,柱前衍生化法行之有效。在此,使用Shim-pack XR-0DS以更短的时间进行了氨基酸分析。
使用异硫氰酸苯酯进行衍生化。柱后衍生法时需要1小时,柱前衍生化法使用常规色谱柱时需要25分钟的分析可缩短至4分钟。
色素的UFLC分析
添加在食品中的色素有合成化合物和天然化合物,这些色素水溶性高,多用HPLC进行分析。但在多个色素组合使时,同时分析所需时间长。在此表示使用Shim-pack XR-ODS超快速LC进行的色素同时分析例。12种成分色素的同时分析的结果如下张色谱图。使用常规LC所需分析时间为50分钟,而使用超快速LC,约6分钟便结了分析。
多环芳烃(PAHs)的UFLC分析
PAHs是一种判断车辆等废气污染大气环境程度的化学物质。PAHs具有强致癌性,所以这些物质的大气监测是重要的测定项目。PAHs显示强荧光,可以利用荧光检测器进行高灵敏分析。
对于此10种PAHs的分析,在不损失分离状态下,相对于常规LC (分析时间50分钟) ,UFLC实现了10倍速度的快速化分析(分析时间5分钟)。
主要特点:
综合当前快速化的基本要求,岛津开发了新型号的Prominence UFLC超快速液相色谱仪,使用标准部件,可以同时满足用户传统常规分析和快速化分析的需求,也可支持高达85℃的操作温度,从而使更低压力下的快速分析成为可能,同时该仪器体现出的性能和高通量即使是在更昂贵的仪器配置上也不多见。
Prominence UFLC通过以下特性支持快速分析:
1、 小管路和小体积的流通池降低了色谱柱外峰展宽效应。
2、 使用2.2µm颗粒大小的色谱柱Shim-pack XR-ODS。
Shim-pack XR-ODS是考虑上述填料细微化的问题,从分离效率和压力的关系中巧妙找到平衡,可提高或维持分离效果的同时缩短分析时间的新一代快速分析用色谱柱。
2.1 小理论塔板高度是常用色谱柱(5µm)的1/2以下
2.2 流动相流量是常用色谱柱(5µm)的2倍以上
2.3 理论塔板数和常用色谱柱(5µm, 柱长150mm)同等或以上
2.4 柱压在流速下几乎所有分析条件中都是30MPa以下
2.5 色谱柱的特性和Shim-pack VP-ODS相同
3、 Prominence SIL-20A自动进样器实现10秒钟10µL的超快速进样。
4、 Prominence SIL-20A 自动进样器交叉污染仅0.005%
5、 支持高达85℃的高温分析。
温度与快速分析:随着柱温升高,理论塔板数增加,柱效增加,柱压降低。
但是高温也会引起很多的相关问题,例如色谱柱的劣化、导致对温度敏感的样品的分解、温度差异带来的色谱峰的展宽现象、流动相气化带来检测的不稳定等等,同时在硬件的实现方面有着很多的问题,在应用时应引起注意,所以岛津建议高温分析只是作为快速分析的辅助手段加以运用。
6、 具备高采样频率的检测器,可以实现快速的数据获取而不会丢失信息。
总的来说,快速液相色谱的目标就是高通量,也就是说每天或每小时有更多的样品被分析。真正的快速化是整个分析周期的缩短,为了实现高通量,不仅要缩短单个样品分析时间,而且整个循环进样和分析时间也必须优化。为了实现缩短分析周期,如下两点需注意:
1、 自动进样器的样品注入速度。
2、 不依赖于清洗,降低交叉污染。
Prominence UFLC自动进样器的样品注入速度为10秒,对进样针实施了特殊处理,减少针接触面等方法降低了样品的交叉污染,从而使得分析周期大幅度缩短,实现真正的超快速高通量分析。