PuriToxSR 多功能净化柱
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呕吐毒素专用净化柱TC-T200样品前处理呕吐毒素HPLC检测仪器配件200g天平或250ml烧瓶搅拌机刀片或杯盖搅拌机或振荡器、计时器、带盖样品杯、漏斗、量筒、涡旋仪、1-5ml移液器及相应吸头100μl 玻璃注射器、0＃橡胶塞、蒸发装置、烧瓶 需要的试剂和标准品乙腈、蒸馏水、呕吐毒素内标添加溶液呕吐毒素HPLC级标准品 耗材PuriToxSR呕吐毒素专用净化柱TC-T200定量滤纸、15 x 125mm试管、带盖自动进样瓶I.目的简述用液相检测小麦，面粉，玉米和其他简单样品中呕吐毒素的步骤。
II. 说明该检测步骤适用于检测小麦，面粉，玉米和其他简单样品。
检测限:100ppb III. 检测步骤A.
提取 （注意:样品必须碾磨并混合均匀）固体样品
1. 取25g磨碎的样品到烧瓶或搅拌瓶中。
2. 加100ml（对麸皮和麦麸，加150ml） 84/16 乙腈/水到样品中。
3. 盖紧后振荡1.5小时或高速搅拌3分钟。4. 过滤到样品杯，盖上盖。
B. 准备标准品溶液和样品添加溶液1. 取20ml 84/16 乙腈/水溶液到250ml的烧杯中。
2. 上述溶液中加200μl呕吐毒素HPLC级标准品（50μg/ml呕吐毒素标准品，溶于甲醇）
3. 盖上盖，混合均匀。注意:标准品溶液相当于100% 的回收率下2ppm的呕吐毒素。
C. 净化步骤1. 将PuriToxSR 专用净化柱TC-T200放入 15 x 125mm 试管中。
2. 取2.0ml样品提取液和内标添加溶液到多功能净化柱顶端。
3. 向下推活塞，使溶液完全过柱，收集纯化溶液到15 x 125mm 试管中。
4. 取出注射器，加入2 x 4ml 84/16 乙腈/水到柱子顶端。将所有溶液彻底过柱，收集到上一步的15 x 125mm 试管中。
5. 在60℃蒸干。
IV. HPLC 的准备
A. HPLC 条件1. 柱子：Spheri-5, RP-18, 5micron, 100x 4.6mm2. 流动相: 92/4/4 水/甲醇/乙腈。
3. 流速: 1ml/min4. UV-VIS检测器: Applied Biosystems-220nm5. 保留时间：约9 分钟
；B. 标准品准备
1. 取2ml准备好的标准品溶液（参加IIIB）到15 x 125mm试管中。2. 蒸干，按照Ⅳ-C进行下一步。
注意:在每5个样品后加一个标准品溶液，使用这个标准品溶液的值来计算内标添加溶液的回收率。
C. 样品和内标添加溶液
1. 用750ul流动相重新溶解蒸干的残留物（Section III-C, Step 5）。
2. 盖上盖后，涡旋混合30秒。
3. 取750ul到自动进样瓶，该上盖。
D. HPLC进样取200ul样品，内标添加溶液和标准品到液相仪器。
V. 结果计算在上述步骤的内标添加，从一开始的时候就要进行，并通过HPLC的软件校正。结果要进行记录以备将来参考。内标添加结果可以结合样品进行方法的评价。内标添加的结果要在75％或更好，否则，需要进行重复确定。建议对所有的阳性样品用确证的标准方法进行确定。结果计算并转换成ppb单位：
固体样品:(25g 样 品/100ml 提取溶液)x( 2ml 净 化 样 品/750μl 稀释的提取液)x 200μl 进样量 = 0.133g样品