试剂盒未提供的材料

1.    蒸馏水或去离子水

2.    可吸取50ul的移液器及吸头

3.    可吸取50ul和100ul的八道移液器及吸头

4.    吸水纸或相当的吸水材料

5.    带450nm滤光片的酶标仪

6.    计时器

7.    洗瓶

8.    20mM PBS： 0.62g NaH2PO4-2H2O+5.73gNa2HPO4-12H2O+9gNaCl  蒸馏水定容至1000ml

试验准备

干猫粮的提取方法：稀释系数：10

1)用搅拌机均质干猫粮样品。

2)称取1 g均质样品，加10 mL 20mM PBS。

3)剧烈涡旋振荡后超声裂解样品1min。再次振荡1min后静置5min。

4)10 000rpm离心10min。

5)用G6玻璃滤纸过滤清澈的上层相，然后用干净的瓶子储存提取液。

6)提取液样品可直接用于试验。

备注：如果没有玻璃滤纸可以用性滤器和性针筒过滤。

检测步骤  (注意: 标准及样品做平行试验以增加准确度.)

1.    将所有试剂及样品置于室温下，用实验室级的水充满洗瓶。

2.    从铝箔袋中取出相应数量的微孔条，放入干燥剂并重新封好袋子以免微孔条受潮。

3.    吸取100ul标样或稀释的样品提取液到相应的微孔。每个样品使用一个新的吸头。每孔加50ul三聚氰胺HRP酶标记物。

4.    轻轻混合60秒，孵育30分钟。

5.      孵育完后，将微孔中的溶液倒入水槽中，用洗液完全充满微孔，震荡后倒掉，重复三次，总共洗板四次。

6.      在吸水纸上拍打，尽可能将水拍干。

7.      每孔加入100ul底物溶液。

8.      孵育20分钟。

9.      每孔加入100ul终止液。

10.   用酶标仪读取450nm下的吸光值。我中心提供检测三聚氰胺所需全部试剂，设备，如有需要请来电!联系电话：

提供的产品有：

甲醇：色谱纯。

乙腈：色谱纯。

氨水：含量为25％～28％。

三氯乙酸。

柠檬酸。

辛烷磺酸钠：色谱纯。

三聚氰胺标准品

混合型阳离子交换固相萃取柱

微孔滤膜

高效液相色谱(HPLC)仪

分析天平

离心机

超声波水浴

固相萃取装置

氮气吹干仪

涡旋混合器

具塞塑料离心管

色谱柱：C8柱，250 mm×4.6 mm(i.d.)，5 μm

C18柱，250 mm×4.6 mm(i.d.)，5 μm

吡啶：优级纯。

衍生化试剂

酶标仪

三聚氰胺试剂盒