色谱分离度的确定

发布时间:2018-03-06 10:22

  在具体分析工作中,色谱分离度究竟确定多大才好,视样品要求及定量方法不同而异。根究上文讨论的原则,结合实际情况选择固定液、柱长、载气线速度和柱温等条,使各参数符合所需分离度的要求。
  1、两个不等面积色谱峰欲分离到不同纯度时所需的理论板数
  对二交叠且不等面积的二色谱峰,则会产生相互干扰,此时分离不同纯度的n需要值可从公式.jpg,关系图中可以查的(事先确定R值),关系图中n为杂志组分与主组分的比值比值.jpg,n1=△a/2a1,n2=△a1/a2;A1组分1峰面积百分数:峰值面积.jpg;A2组分峰面积的百分数:峰值面积.jpg;A1+A2=1公式.jpg;当A1≠A2时,n值需乘以归一化因子公式.jpg
  2、不同定量方法,不同杂质含量时对R值的要求
  此情况对分离度要求显然不同,若二组分色谱峰交叠,采用峰面积定量,常用相交点中切法,可不比考虑组分的纯度影响。因此种状况二峰互为混入他峰杂质,所以只知二者综合后对面积定量的影响即可。如果采用峰高定量时,只需峰顶点无其他组分干扰便可,对R值要求显然要低得多,对一个具体任务而言:
  2.1提出分析误差(EA)的要求;
  2.2初试验测出难分二组分峰高比Φ值;
  2.3通过误差函数计算出R1/2或R值来,其定量分析误差EA与R1/2,φ之间的关系为:
  依此可求得当EA≤1%时,不同含量(φ值不同)所要求的达到的R1/2值(R值),可见下表。

关系式.jpg

  不同定量方法当含量变化时对R值的要求

不同定量方法当含量变化时对R值的要求.jpg

  当用峰高定量时,定量误差Eh与R1/2,φ值间的关系为:

关系式.jpg

  进而可以求出当EA≤1%时,不同含量(φ值不同)所要求达到的R1/2
  以上讨论及表列出的数据系指正常柱负荷范围内。对痕童分析,φ值过大,试样量大,主峰掩盖杂质峰(例如大量组分中的微量高沸点杂质峰),此时的分离要求很高的R值(大于正常柱负荷时R值的几倍或十几倍),如果色谱系统达不到要求,则需要全部改选恒量分析条件。

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