液相色谱的色谱泵吸滤头，进出口阀及管路(包括进样器和检测池)若被污染，应做清洗和钝化处理，先清洗再钝化。那如何进行清洗和钝化呢?本文将做详细介绍。

　　一、清洗

　　清洗的目的是去除不锈钢管路及系统内的污垢，清洗必须在钝化之前完成。通常使用30%磷酸水溶液清洗，具体操作如下:

　　1.取下色谱柱，改用两通连接。

　　2.用超纯水灌注泵头。

　　3.用30%磷酸水溶波以1mL/min的流速冲洗1h(UPLC降低流速增加冲洗时间)。

　　4.换成超纯水冲洗至出水口水pH显中性。

　　5.用纯甲醇过渡，浸润泵头及管路，备用。

　　二、钝化

　　钝化的目的是使不锈钢管路的内表面形成光滑均匀的氧化膜。钝化主要为了解决物质的拖尾问题。这些物质主要是极性明离子的分析物，如含磷酸官能团的分析物，有机酸分析物，糖苷类物质和生物大分子(包含多肽，蛋白、核苷等)。以下是钝化的目的和具体操作：

　　1.钝化的目的

　　-防止腐蚀:钝化层可以阻止金属与腐蚀介质接触，减少金属腐蚀速度。

　　-增加耐久性:钝化层可以提高金属的耐久性和抗磨损性能，延长其使用寿命。

　　-改善峰形:金属离子和待测物形成相互作用，会造成色谱峰消失或峰展宽。特别是对含有磷酸基团或羧酸基团的物质具有明显的峰形改善。

　　2.钝化具体操作

　　-取下色谱柱，改用两通连接，用纯水灌注泵头。

　　-用6M硝酸水溶液以1mL/min的流速钝化1h(UPLC降低流速增加钝化时长)。

　　-换成清水洗至出口水pH显中性。

　　-用纯甲醇过渡，浸润泵头及管路，备用。

　　3.如果钝化解决不了，那就解决残存的金属离子。解决思路有两个，一个是竞争金属离子，一个是消灭金属离子

　　-竞争金属离子:在流动相中加入EDTA或柠檬酸或亚甲基二磷酸，也可使用基质样品饱和管路，使用高浓度待测物饱和管路，酸化样品等都是可供尝试的策略，注意在质谱系统中EDTA可能造成离子抑制，造成分析物的信号降低，亦可能在喷针尖端析出。

　　-消灭金属离子：替换掉金属管路，比如使用生物惰性仪器组件和色谱柱硬件(如月旭金刚石柱管色谱柱)等。

　　总结：以上是液相色谱的清洗和钝化方法，希望对您有所帮助。