分光光度计的工作原理基于物质对光的吸收作用，通过测量溶液的吸光度值来测定溶液的浓度。其核心原理包括以下几个方面：

　　1.光源与单色器

　　分光光度计使用一个可以产生多个波长的光源，通过一系列分光装置产生特定波长的单色光。这些单色光随后照射到测试样品上。

　　2.样品室

　　光线透过测试的样品后，部分光线被吸收。样品的吸光值与样品的浓度成正比，这一过程遵循朗伯-比尔定律（Lambert-Beer Law），即吸光度A与溶液的浓度c、液层的厚度b（光程）以及吸光系数ε有关，表达式为A = εbc。

　　3.检测器

　　透射光经过样品后，其强度由检测器测量。检测器将光信号转换为电信号，并进一步处理成吸光度或透射比等数值显示出来。透射比准确度通常小于或等于±1nmT。

　　4.双光路、双光束光学系统

　　这种系统通过比较参考光路和样品光路的信号，以减少误差，提高测量的准确性和重复性。

　　5.波长范围

　　分光光度计的测量范围包括可见光区（380~780 nm）和紫外光区（200~380 nm）。不同的光源有其特定的发射光谱，例如钨灯光源在可见光区的应用。

　　6.应用领域

　　分光光度计在化学、生物、医学、食品、环境等领域有广泛应用，通过测定物质在特定波长处的吸光度或发光强度，进行定性和定量分析。

　　综上所述，分光光度计通过光源产生单色光，照射样品后测量透射光的强度，利用光的吸收定律计算样品的浓度，从而实现精确的定量分析。