工作原理
三氮三种测定方法原理
发布时间:2024-05-15 09:20三氮测定有4种方法,4种方法的工作原理是怎么样的呢?看以下的分解:
1.凯氏定氮法
适用于测定天然有机物(如蛋白质、核酸及氨基酸等)的含氮量。在浓硫酸的作用下,有机物中的碳、氢元素被氧化成二氧化碳和水,而氮则转变成氨,进一步与硫酸作用生成硫酸铵。在这个过程中,加入硫酸钾或硫酸钠提高反应液的沸点,并使用硫酸铜作为催化剂。甘氨酸的消化过程可以通过浓碱分解硫酸铵,游离出氨,并通过水蒸汽将氨蒸馏到硼酸溶液中。硼酸吸收氨后,溶液中的氢离子浓度降低,通过标准无机酸滴定,直至恢复溶液中原来氢离子浓度为止,最后根据所用标准酸的当量数计算出总氮量。
2.酸水解-蒸馏法
土壤样品与6M盐酸在100℃下共同加热12小时,用碱中和至中性,获得供分析用的酸水解液。随后通过茚三酮氧化法测定释放出的氨,即可得到氨基酸态氮的量。茚三酮与含有自由氨基的化合物(如蛋白质、多肽、氨基酸)共热时,能产生紫色化合物,通过比色法进行测定。
3.双指示甲醛滴定法
氨基酸具有酸型的-COOH基和碱性的-NH2基。加入甲醛溶液时,-NH2基于甲醛结合,从而使其碱性消失。可以用强碱标准溶液滴定-COOH基,从而间接测定氨基酸态氮的量。
4.电位滴定法
根据氨基酸的两性作用,加入甲醛以固定氨基的碱性,使羧酸显示出酸型。将酸度计的玻璃电极及甘汞电极同时插入被测液中构成电池,用氢氧化钠标准溶液滴定,依据酸度计指示的pH值来判断和控制滴定终点。