4-氯苯氧乙酸钠的介绍

4-氯苯氧乙酸钠，国内商品名为防落素、保果灵。它可以促进植物体内的生物合成和生物转移，不仅可防止落花落果、提高做果率、增进果实生长速度、促进提前成熟，还能达到改善植物品质之目的，同时它还有除草剂的作用  。在豆芽生产中，4-氯苯氧乙酸钠的应用十分广泛，它可以促进豆芽下胚抽粗大，减少根部萌发，加速细胞分裂。但由于其对人体有一定积累毒性，国标已取消其作为食品添加剂的生产许可申请。

有关的食品安全限量规定

国家质量监督检验检疫总局《关于食品添加剂对羟基苯甲酸丙酯等33种产品监管工作的公告》（2011年第156号公告）对4-氯苯氧乙酸钠、6-苄基腺嘌呤、等33种产品的食品添加剂注销生产许可申请。GB2760-1996对4-氯苯氧乙酸钠检测限量为1 mg/kg。逗点生物开发出使用SPE方法检测豆芽中4-氯苯氧乙酸钠的含量，平均回收率90%，为客户提供关于4-氯苯氧乙酸钠检测有效的解决方案。

一、实验目的

本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，HPLC法作为分析方法，检测豆芽中4-氯苯氧乙酸钠的含量。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。

二、实验目标物

4-氯苯氧乙酸钠(CAS:13730-98-8)

三、应用范围

本方法适用于豆芽中4-氯苯氧乙酸钠检测的HPLC检测及确证。

四、实验材料   

biocomma Copure HLB固相萃取柱60 mg/3 mL (Cat. No. COHLB360)

五、实验方法

1、样品提取

试样经过搅碎后，称取5.00 g（至0.01 g）置于50 mL离心管中，加入10 mL0.01 moL/L NaOH溶液，涡旋1 min，超声提取10 min，10000 r离心5 min，上清液倒入另一50 mL离心管（如有杂质，用玻璃纤维滤纸过滤），再加5 mL NaOH按上面步骤重新提取，合并提取液，加入1.2 mL50%H₃PO₄溶液，待净化。

2、SPE柱活化

(1)活化：加3 mL甲醇活化，5 mL水平衡HLB柱；

(2)淋洗和洗脱：加入待净化液，弃去流出液；用10 mL 5%甲醇水淋洗，弃去流出液，抽干小柱；加入4 mL甲醇洗脱，收集流出液。（整个过程控制流速为1mL/min）

(3)重新溶解：加1 mL 甲醇溶液溶解。经0.22 μm滤膜过滤，供高效液相色谱测定。

3、HPLC条件  

设   备：Waters Alliance 2695

色谱柱：Phenomenex  kinetexC18(250 mm×4.6 mm,5 μm)

检测器：Waters DAD检测器

检测波长：226 nm

流动相：A:乙腈   B:0.01 moL/L NaH₂PO₄·2H₂O

表1 等度洗脱条件

流速：1.0 mL/min   

进样体积:20 μL 

六、实验结果

1、添加水平为1.0 mg/kg4-氯苯氧乙酸钠的添加回收结果

表2  1.0 mg/kg4-氯苯氧乙酸钠的添加回收结果

2、添加水平为1.0 mg/kg4-氯苯氧乙酸钠的液相色谱图

图1  添加水平为1.0 mg/kg4-氯苯氧乙酸钠检测的液相色谱图

结论：豆芽中4-氯苯氧乙酸钠检测的平均回收率是90.59%，RSD是5.96%，满足标准要求。