犬抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA试剂盒实验原理及注意事项

发布时间:2015/11/12 10:42:00

犬抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA试剂盒实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中犬抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP 5b)水平。用纯化的犬抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP 5b)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP 5b),再与HRP 标记的抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP 5b)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP 5b)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中犬抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP 5b)浓度。
犬抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA试剂盒注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。加样时间
控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值
大于标准品孔孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。