储存条件：

蛋白酶抑制剂-20℃保存；磷酸酶抑制剂2-8℃保存；蛋白提取液室温保存。

有效期：

一年。

注意事项：

● 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。

● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

● 使用性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。

● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品简介：

????细菌总蛋白提取试剂盒可以从各种菌体中提取总蛋白，包括革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌，可用于纯化蛋白的粗品制备及总蛋白制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。该试剂盒提取的蛋白具有天然活性，可用于基因检测、SDS-PAGE 电泳检测、Western blotting、凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活分析等下游实验。每毫升菌液大概可以提得5-10mg 蛋白。采用BCA 或Lowry 法进行蛋白定量。

产品特点：

1、使用方便：不需昂贵设备。

2、可以处理各种细菌菌体，包括新鲜菌液和冰冻菌体。

3、将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。

4、采用温和的中性裂解组分，保持蛋白活性。

5、含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。

6、紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。

7、蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6 种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。

该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

8、本试剂盒中不有 EDTA，与金属螯和层析等兼容。

试剂盒以外自备试剂和仪器

● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管

● 涡旋振荡器 ● 冰箱，冰盒

使用方法：

使用注意事项：

?? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

?? 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

?? 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

?? 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

?? 本试剂盒中提取液和蛋白酶抑制剂中均不含 EDTA，根据需要可自行加入。

细菌蛋白提取

1、裂解液的准备：根据所需要提取的样本量，每500ul裂解液中加入2ul蛋白酶抑制剂Mix和2ul磷酸酶抑制剂Mix和5ul蛋白稳定液，充分混匀后置冰上备用。

2、在4℃ 12000RPM条件下将菌液离心5min，弃上清，尽量吸干剩余液体，收集菌体，用PBS洗菌体2次。若为冷冻菌体直接进行下面操作步骤即可。

3、按每20mg湿重菌体样本加入500ul裂解液，吹打混匀，冰上放置20-30分钟。

4、300w，10s超声/10s间隔条件下冰浴超声至菌液变清。

5、在4℃ 12000RPM条件下将菌液离心5分钟，将上清移入冷的干净离心管。

6、即得到总蛋白样品。

7、将总蛋白样品定量后分装置于-80℃冰箱或直接用于下游实验。