荧光定量PCR检测仪
荧光定量PCR检测仪是一种通过荧光染料或荧光标记的特异性探针,对PCR产物进行标记跟踪,并实时监测反应过程的仪器。
应用领域
荧光定量PCR检测仪具有广泛的应用领域,包括但不限于以下几个方面:
1.基础科研
在基因表达分析和丰度检测中,荧光定量PCR技术可以准确获取细胞、组织或样品中特定基因的表达量及其在生物体内的分布情况,有助于理解基因功能、揭示生物体生长发育规律以及探索疾病发生机制。
2.医学检测
作为病原体检测和遗传病筛查的重要手段,荧光定量PCR技术可以检测血液、体液或组织样本中的病原体DNA或RNA,快速准确地诊断出感染性疾病(如乙肝、丙肝、艾滋病等)和遗传性疾病。
3.食品安全
通过检测食品中的致病菌(如沙门氏菌、大肠杆菌等)和转基因成分(如转基因作物中的外源基因),荧光定量PCR技术能够确保食品的安全性和合规性。
4.农业研究
在农业研究领域,该技术可用于检测植物基因组中的突变和表达量变化,评估作物的生长发育情况和适应性,为作物遗传改良和品种鉴定提供科学依据。
维护保养
1.仪器外表清洁
定期使用软布加少量清水擦拭仪器表面,若有试剂泄漏,应使用软布加70%酒精擦拭干净。
2.反应孔清洁
反应孔应定期清洁,一般3个月一次,可用吹气球轻轻吹拭,以防止尘土影响PCR扩增和荧光检测。
3.保护仪器
避免频繁开关仪器,两次开关间隔时间不得低于30秒。实验结束后,保持待机状态10分钟,待模块温度降至室温再关闭电源。
4.替换保险丝
若保险丝损坏,应关闭电源并拔掉电源线,用一字螺丝刀逆时针拧开保险丝盒盖子,取出保险丝并替换新的保险丝(型号为F8AL250V)。
5.废物处理
每次试验结束后,应按相关规定处理废物,避免污染实验室及仪器。
6.过热保护
仪器的加热系统设有过热保护设备,若加热系统发生故障,保护设备会自动断开,此时应中止使用,及时联系生产商进行修理。
使用注意事项
1.样品准备
确保样品的质量和纯度,避免有杂质或受到污染。同时,根据实验需要适当稀释样品,以避免过高的浓度对荧光定量PCR反应的影响。
2.引物设计
合理设计引物序列,确保引物的特异性和互补性,避免引物间的二聚体或非特异性扩增。
3.反应体系准备
准确配制反应体系中的各组分,包括引物、模板DNA、荧光标记的探针和PCR反应缓冲液等。
4.仪器操作
在操作过程中,注意保持环境的洁净和仪器的稳定性。同时,根据实验需要设置合适的PCR仪参数,如温度、时间和周期数等。
5.结果分析
结合相应的软件对检测结果进行定性和定量分析,确保结果的准确性和可靠性。
工作原理
荧光定量PCR检测仪基于聚合酶链式反应(PCR)原理,利用荧光信号来监测DNA片段数量的变化。在PCR反应体系中加入荧光基团,当PCR扩增进行时,荧光信号会随之增强。这些信号经过光学系统收集后,被转化为电信号并进行数据处理,最终得出目标基因的拷贝数或表达量。