应用
1、生物科学研究
超微量分光光度计在生物科学领域中的应用非常广泛。它用于核酸、蛋白质、酶等生物大分子的定量分析,支持分子生物学、生物化学等研究。
2、医学诊断
在医学实验室中,超微量分光光度计用于血清学、临床生化等方面的医学诊断。它可以快速准确地测定体液中的生化指标,帮助医生进行疾病诊断和治疗监测。
3、药物研发
药物的研发过程中需要对药物的质量进行严格控制。超微量分光光度计可以用于药物的含量分析、纯度检测以及反应动力学的研究。
4、环境监测
在环境科学领域,超微量分光光度计可用于水质、大气等环境样品中微量污染物的检测。它有助于监测环境中的有害物质,保障生态环境的健康。
5、食品安全检测
超微量分光光度计在食品工业中用于检测食品中添加物、重金属、污染物等微量成分,确保食品的质量和安全。
6、化学分析
用于一般的化学分析,如测定溶液中金属离子、有机物等的浓度,适用于各种化学实验和工业生产中的质量控制。
7、农业领域
超微量分光光度计可以用于农业土壤中养分的检测,帮助农业科学家了解土壤质量,指导农业生产。
8、材料科学
在材料科学研究中,超微量分光光度计可用于材料的表征和分析,如纳米材料的光学性质研究等。
工作原理
超微量分光光度计是一种用于测量微量物质浓度的仪器,其原理基于光的吸收和透射特性。通过测量样品溶液对特定波长的光的吸收程度,可以确定其中某种物质的浓度。超微量分光光度计在生物化学、药物分析、环境监测等领域具有广泛的应用。
超微量分光光度计的原理是利用比尔-朗伯定律。根据比尔-朗伯定律,溶液中吸光度与浓度成正比,路径长度和吸收系数成正比。当样品溶液通过光束时,其中的某种物质会吸收特定波长的光,其吸光度与浓度成正比。通过测量样品吸光度,可以推断出其中某种物质的浓度。
超微量分光光度计通常使用单色光源发出单一波长的光,经过样品后,光电二极管或光电倍增管接收透射光强度,通过检测器将光强转化为电信号。接收到的信号经过放大和处理后,显示在仪器的屏幕上。根据比尔-朗伯定律,通过测量吸光度与浓度的关系,可以计算出样品中某种物质的浓度。
操作规程
一、仪器准备
在使用超微量分光光度计之前,需要进行以下准备工作:
1.仪器接通与预热
-将超微量分光光度计的电源接通,并确保仪器止常启动
-根据仪器使用说明书,预热仪器,通常需要预热15分钟个30分钟,使其温度稳定。
2.样品和试剂准备
-准备样品和试剂,并按照实验要求进行稀释或浓缩,使其适合测量范用。
-预留空自试样,川于校正仪器测量误差。
3.光程设置
-根据样品的浓度范围和所选的测量波长,确定合适的光程。通常光程选择为lcm.
-根据仪器要求,选择合适的比色叫或试管,并确保其清洁且无气泡。
4.仪器校准
-使用己知浓度的标准物质进行仪器校准,校准操作根据仪器型号可能有所差异,请参考仪器说明书。
-确保校准结果误养小于仪器规定的范围,否则需重新校准。
二、测量操作
超微量分光光度计的测量操作步骤如下:
1.设置测量波长
-打开仪器软件或面板,选择所需的测量波长。
-根据实验要求,选择合适的波长,这通常由所测量的物质决定。
-确认仪器已经稳定在所选的波长上。
2.空白校准
-取一个清洁的比色皿或试管,加入适量的去离子水。
-将比色皿或试管放入仪器样品槽中,确保光程设置正确。
-点击软件或面履上的空白校准校钮,校准仪器的基线。
-等待校准完成,确保仪器返回零点。
3.样品测量
-取一个干净的比色皿或试管,加入适量的样品。
-将比色皿或试管放入仪器样品槽中,确保光程设置正确。
-点击软件或面敏上的测量按钮,开始测量样品的吸光度。
-等待测量完成,记录吸光度数值。
4.重复测量和平均值
-可根据需装对同一样品进行多次测量,以提高结的精性。
-记录各次测量的吸光度数值,并计算平均值。
三、结果处理
测量结束后,需要对测得的吸光度数值进行处理,通常包括数据分析和结果计算等步骤。
特点
1.所需样品体积小,仅需1~2μL。
2.不需要比色皿,用移液枪直接将样品滴加到检测平台上,测量时样品自动形成液柱,检测完成后只需用干净的吸水纸将样品从检测平台上擦拭干净即可。
3.具有1mm和0.2mm两个光程(电机控制自动选择光程),样品无需稀释,测量范围可达到常规分光光度计的50倍。
4.氙气闪光灯为灯源,寿命长,性能稳定。
5.不需要预热,可随时检测。
6.显示吸光度值的同时,程序直接给出浓度值(核酸、蛋白和荧光染料)。
7.体积小:相当于一本字典大小,仅占16.5厘米实验室空间。
组成结构
各种型号的分光光度计基本结构都相同,由如下五种部分组成:
1.光源(钨灯、卤钨灯,氢弧灯,氘灯、氙灯或激光光源);
2.单色器(滤光片、棱镜、光栅、全息栅);
3.样品吸收池;
4.检测系统(光电池、光电管、光电倍增管);
5.信号指示系统(检流计、微安表、数字电压表、示波器、微处理机显像管)。